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條紋花葉病毒快速檢測

發(fā)布時間:2025-05-27

關鍵詞:條紋花葉病毒快速檢測范圍,條紋花葉病毒快速檢測機構(gòu),條紋花葉病毒快速試驗儀器

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來源:北京中科光析科學技術研究所

文章簡介:

檢測項目病毒粒子形態(tài)學觀察、外殼蛋白分子量測定、核酸提取純度分析、dsRNA特征片段鑒定、衣殼蛋白抗原表位定位、侵染性克隆構(gòu)建驗證、系統(tǒng)侵染動態(tài)監(jiān)測、交叉保護效果評估、寄主范圍測定、癥狀學分級標準、傳播介體特異性檢測、溫度鈍化點測試、稀釋限點測定、體外存活期試驗、血清學反應效價測定、核酸雜交特異性驗證、RT-PCR引物特異性評價、實時熒光定量Ct值分析、全基因組測序拼接、進化樹構(gòu)建分析、重組事件篩查、沉默抑制因子功能驗證、病毒載量定量模型建立、抗血清制備效價測試、免疫膠體金試紙條靈敏度驗證、超薄切片制備技
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因業(yè)務調(diào)整,部分個人測試暫不接受委托,望見諒。

檢測項目

病毒粒子形態(tài)學觀察、外殼蛋白分子量測定、核酸提取純度分析、dsRNA特征片段鑒定、衣殼蛋白抗原表位定位、侵染性克隆構(gòu)建驗證、系統(tǒng)侵染動態(tài)監(jiān)測、交叉保護效果評估、寄主范圍測定、癥狀學分級標準、傳播介體特異性檢測、溫度鈍化點測試、稀釋限點測定、體外存活期試驗、血清學反應效價測定、核酸雜交特異性驗證、RT-PCR引物特異性評價、實時熒光定量Ct值分析、全基因組測序拼接、進化樹構(gòu)建分析、重組事件篩查、沉默抑制因子功能驗證、病毒載量定量模型建立、抗血清制備效價測試、免疫膠體金試紙條靈敏度驗證、超薄切片制備技術規(guī)范、負染電鏡制樣標準化流程、納米孔測序快速鑒定技術驗證

檢測范圍

玉米葉片樣本、小麥穗部組織、水稻莖稈汁液、高粱根系分泌物、甘蔗韌皮部切片、大麥籽粒胚乳、燕麥葉鞘表皮細胞懸浮液、黑麥草氣孔保衛(wèi)細胞刮取物、狗尾草維管束顯微樣本、稗草花葉病斑研磨液、黍子葉脈浸出液樣本、薏苡種子表面沖洗液樣本組培苗離體培養(yǎng)物篩選樣本人工接種陽性對照樣本田間自然發(fā)病典型病株系統(tǒng)侵染植株整株取樣無癥狀帶毒植株潛伏期樣本昆蟲介體唾液腺提取物機械接種摩擦接種液種子帶毒率測定樣本土壤殘留病毒活性測試樣本灌溉水樣過濾濃縮物農(nóng)具表面擦拭取樣樣本

檢測方法

1.雙抗體夾心ELISA法:采用單克隆抗體包被微孔板捕獲病毒顆粒,酶標二抗顯色定量分析抗原濃度。

2.實時熒光定量RT-PCR:設計特異性TaqMan探針靶向CP基因保守區(qū)段,通過Ct值計算病毒核酸拷貝數(shù)。

3.免疫膠體金層析技術:利用納米金標記抗體與病毒顆粒結(jié)合顯色帶實現(xiàn)現(xiàn)場快速診斷。

4.超薄切片電鏡觀察:經(jīng)戊二醛-鋨酸雙重固定后制備70nm切片觀察病毒粒子晶體排列特征。

5.小RNA深度測序法:提取18-24nt病毒來源siRNA進行高通量測序及生物信息學組裝。

6.核酸斑點雜交技術:將待測RNA轉(zhuǎn)印至尼龍膜后與地高辛標記cDNA探針進行特異性雜交。

7.生物測定法:采用昆諾藜作為指示植物進行汁液摩擦接種觀察典型枯斑反應。

8.等溫擴增技術:使用逆轉(zhuǎn)錄重組酶聚合酶擴增(RT-RPA)在恒溫條件下快速擴增靶序列。

檢測標準

GB/T36851-2018植物病毒ELISA檢測技術規(guī)范

NY/T2287-2019禾本科作物病毒病田間調(diào)查與分級標準

SN/T2127-2019進出境植物檢疫玉米條紋花葉病毒檢疫鑒定方法

ISO16140-3:2021分子生物學方法驗證通用技術要求

EPPOPM7/98(2)植物病毒診斷規(guī)程

GB/T3543.5-2020農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程真實性和品種純度鑒定

ISO21571:2020食品中病毒核酸檢測前處理通用指南

NY/T401-2021脫毒種薯(苗)病毒檢測技術規(guī)程

GB/T19495.5-2018轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測核酸定量PCR方法

ASTME3022-18分子生物學檢測方法驗證標準指南

檢測儀器

1.全自動酶標分析儀:配備450nm/630nm雙波長濾光片系統(tǒng)完成96孔板吸光度精確測量。

2.實時熒光定量PCR儀:配置FAM/HEX雙通道光學模塊實現(xiàn)多重靶標同步擴增監(jiān)測。

3.超速離心機:配備SW32Ti轉(zhuǎn)子完成病毒顆粒蔗糖密度梯度純化(100,000g離心)。

4.冷凍透射電鏡:采用場發(fā)射電子槍在200kV加速電壓下獲得0.2nm分辨率病毒粒子圖像。

5.核酸蛋白分析儀:通過紫外吸收法測定A260/A280比值評估核酸提取質(zhì)量。

6.全自動電泳系統(tǒng):配置預染蛋白Marker完成外殼蛋白SDS-PAGE分子量精確測定。

7.生物分子相互作用分析儀:基于表面等離子共振技術測定抗體-抗原結(jié)合動力學參數(shù)。

8.超低溫樣品粉碎儀:采用液氮預冷研磨罐實現(xiàn)植物組織細胞壁低溫破碎。

檢測流程

1、咨詢:提品資料(說明書、規(guī)格書等)

2、確認檢測用途及項目要求

3、填寫檢測申請表(含公司信息及產(chǎn)品必要信息)

4、按要求寄送樣品(部分可上門取樣/檢測)

5、收到樣品,安排費用后進行樣品檢測

6、檢測出相關數(shù)據(jù),編寫報告草件,確認信息是否無誤

7、確認完畢后出具報告正式件

8、寄送報告原件

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